two-Antibiotic Assay
التجربة شبيهة جدا بالتجربة السابقة
( determination of MIC by agar diffusion method )
أولا الأدوات اللى بتستلمها
2 ماصة 5 مل
ماصة 1 مل
i 2 Pasteur pipette
Loop
حامل الأنابيب فيه
أنبوبة الوزرمان اللى فيها ال culture
أنبوبة فيها saline
أنبوبة فيها test antibiotic
أنبوبة فيها standard antibiotic
2 أنبوبة فاضية
2 طبق
فلاسكة الاجار
وكل الأدوات الزجاجية ملفوفة فى ورق و معقمة طبعا
ثانيا الأدوات المطلوبة منك
Glass pencil
مسطرة وورقتين
الجزء الكاوتش بتاع ال Pasteur
ثالثا ال procedure
i1- preparation of seeded agarنفس الخطوات بالظبط زى التجربة السابقة
i2-Preparation of 2 fold serial dilutioni1-Mark the empty test tbes as T2 and S2
i2-Transfer 2 ml of saline into 2 empty test tubes
i3-Transfer 2 ml from T to T2 and mix
i4-TransferAnd from S to S2 and mix
يعنى مش بنضيف سالاين فى الأنبوبة
T , S
i3- Making of cupsبنفس الطريقة
لكن هنرقم ال cups
S1 S2 T1 T2
بحيث
S1 قصاد S2
و
T1 قصاد T2
4-
Application of antibioticiبرده بنفس الطريقة
لكن الفرق ان معايا 2 باستير
واحدة لل T
وواحدة لل S
وأبدأ بالتركيز الأقل يعنى S2 و T2
وبعدين ال
S1 و T1
طيب ايه ال comment اللى بتكتبه فى ورقة الإجابة ؟؟
أول حاجة ال procedureوأهم نقط فيها ومش ينفع تنساها
انى باحضر ال seeded agar at 50 – 55
انى باجهز ال antibiotic dilutions by 2 fold serial dilution
انى فى خطوة ال application بابدأ ب lowest dilution
انى باعمل incubation at 37°for 24hours
تانى حاجة بتتكتب ال calculation
على فرض انك بادئ ب
Conc = 1000 Mg / ml
هيبقى كده
والجدول هنا فيه عمود زيادة عن جدول ال MIC
بعد كده بترسم ال curve
Relative potency = anti log d = ....
ليس لها وحدة
آخر حاجة بترسم الأربع احتمالات
مع ملاحظة
بداية الكرفين لازم تبقى على خط عمودى واحد
ونهاية الكرفين لازم على خط عمودى واحد
وامتداد الكرفين يقطعوا فى المحور x أو المحور السينى
وكل ده باين فى رسم الكرف اللى فوق
وكل ال precautions الباقية زى التجربة السابقة
انتهت التجربة الثانية